1. Coverslip

• We recommend using high-precision cover glasses with thickness no. 1.5 to prepare the samples.
  • Zeiss 474030-9010-000 Deckgläser 1,5H hi 100002240928 QS; Thickness no 1 ½ , high-performance 18 mm x 18 mm, 0.170 +/- 0,005 mm
  • Marienfeld Superior: www.marienfeld-superior.com
    • 18×18 mm (Cat.No. 0107032).22×22 mm (Cat.No. 0107052).
    • round with 18 mm diameter (Cat.No. 0117580).
• Fix your cells according to your preferred protocol.
• Please make sure that the cover slip is centered on the glass slide, in order to fit in our samples holder.
• For glass-bottom petri dishes and multi-well plates see:
  • Willco (http://www.willcowells.com/)
  • Lab-tek (offered through Thermo)
  • MatTek (glass bottom dishes
  • ibidi µ-Dish 35 mm, high Glass Bottom (Cat.No:81158)

2. Mounting Media

• Suggested Hardening media:
  • ProLong™ Glass Antifade Mountant P36980   RI 1.52
  • ProLong™ Gold Antifade Mountant   P36930   RI 1.46
• As it is a hardening media, you may also notice it can somewhat flatten samples.
• Do not use mounting media that include DAPI.
• Concerning the refractive index (RI) of the mounting medium, prepare the slides at least 2 days before imaging. Allowing the sample to have sufficient time for curing mounting media and sealant. (2–8°C)
• The following Aqueous(Non-Hardening) Mounting liquid media also works, despite having a lower refractive index. SlowFadeGold /Diamond RI of 1,42. VectaShield H-1000. RI of 1,44

3. Fluorescent Labels for SR-SIM

All common types of organic dyes usually conjugated to antibodies or fluorescent proteins are suitable to be used for SR-SIM. For multicolor samples the fluorophores should be selected for minimal spectral overlap to avoid crosstalk.

• 405 nm (50 mW),
• 488 nm (100 mW),
• 561 nm (100 mW),
• 642 nm (150 mW)

Note： Cytosolic or other non-specific fluorescent protein expression (e.g. GFP) will result in staining of extended areas. Since well-defined structures are missing to interfere with the grid pattern, modulation contrast will be low and the final image will lack high resolution information.

＊本機採認證制＊

須參加原理與儀器介紹課程、有confocal上機經驗，並經專員實機操作教學後，才能申請認證考試，認證考試通過後須於日間時段自行操作5次(含)以上者，才具預約與門禁權限。兩星期內每人最多可預約4次，每時段最多4小時。

• 預約規定：
  • 初次使用請先填寫樣品資訊調查表，待專員回覆確認時間。
  • 使用前請至儀器中心「儀器預約系統」進行預約，預約者須為實際使用者（不得使用他人證件進出）。
  • 儀器使用完畢須確實清潔、關機，並詳實填寫登記本。起始時間為預約時間，終止時間則視實際結束使用時間為準。
  • 不可延遲上機時間或佔用他人時段。
  • 最遲請於前一個工作天16:30前確定，逾時變更視同違規，不予接受。
  • 不可當日取消預約，預約時間逾時半個小時不到者亦視同放棄。

若有長時間活細胞拍攝需求，請來電由儀器管理員協助預約

• 若具以下資格者，收費比照【本校師生】：
  （1）分校 （2）合聘教師  （3）附設醫院  （4）與本校有計畫合作且計畫屬本校管控
• 若具以下資格者，收費比照【建教合作單位】：
  （1）兼任教師  （2）教學醫院（榮民總醫院、臺北市立聯合醫院、亞東醫院等）  （3）台聯大系統  （4）產學運籌中心進駐廠商

儀器以每半小時為收費單位，每奇數月月底統計開單，最遲請於兩週內，攜帶繳費單至行政大樓出納組繳費，領取收據，逾期次數達（含）兩次者，將停止對該實驗室提供服務。

1. 本機禁用隨身碟。由於電腦硬碟空間有限，為有利儀器之正常操作，管理人員將不定時刪除資料，本中心不負責資料保管，敬請見諒。
2. 未經本中心管理員同意，不得擅自於本中心公用儀器上加裝或拆換任何零件、更改系統設定及安裝軟體。若因實驗需要進行任何測試，須先徵求管理員同意，並由原廠工程師陪同，在不傷害正常儀器操作之情況下進行測試，通過測試後方可在本中心管理員許可情況下，由管理員認可之人員操作使用。
3. 依管理員判定違規者第一次警告、第二次取消使用權一個月、第三次永久取消使用權；如違反上述規範，以致儀器損壞者，需照價賠償以利修復儀器，並停止使用權一個月，再違規者則永遠禁止使用。

儀器介紹：EN_product-info_Elyra-7

儀器操作手冊：Manual (20230314 version)

認證操作申請單：Certification form

原理與儀器介紹：The New Era of Super-resolution Microscopy, Elyra 7